利用蛋白穩(wěn)定分析儀“美國Uncle/Unit”發(fā)表的高影響因子參考文獻

高通量多功能蛋白穩(wěn)定性分析儀Unit/Uncle，是得到蛋白分子結構穩(wěn)定性、聚集穩(wěn)定性、膠體分散穩(wěn)定性等多種類型數(shù)據(jù)的設備。該設備既能使用經(jīng)典方法處理數(shù)據(jù)，又新增多種分析模式；既可獲得單一類型數(shù)據(jù)，又可對多種類型數(shù)據(jù)同時測定整合分析；既保證了數(shù)據(jù)質量，又實現(xiàn)了數(shù)據(jù)種類和通量；并且樣品用量少，操作簡單快捷，更能夠解決蛋白樣品數(shù)據(jù)獲得過程中的問題。以此近期多篇利用該設備得到的實驗結果高質量文獻發(fā)表。

2017年，James I. Austerberry 等利用Unchained蛋白穩(wěn)定性分析儀Unit/Uncle在European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 上發(fā)表題為The Effect of Charge Mutations on the Stability and Aggregation of a Human Single Chain Fv Fragment的文章。該研究發(fā)現(xiàn)，盡管發(fā)生了精氨酸或賴氨酸富集的突變體都會發(fā)生相似的蛋白間的天然交聯(lián)，但聚集趨勢會因前者的富集增強，因后者減弱，這為證明賴氨酸在一定條件下可抑制部分折疊的位點間的互作提供了證據(jù)。過充突變體遵循已有的基礎蛋白在酸性環(huán)境下的規(guī)律，即過量的凈電荷會降低結構穩(wěn)定性，增加成核速率，但相反地，由于分子間電荷斥力增加，會減小了聚集體增長速率。該結果果突出了使用構象穩(wěn)定性和天然態(tài)蛋白間相互作用作為聚集特性預測指標的局限性，并為如何構建穩(wěn)定的荷電突變提供了指導。

2017年，Josefine Morgenstern等利用Unchained蛋白穩(wěn)定性分析儀Unit/Uncle在International Journal of Pharmaceutics上發(fā)表題為Effect of PEG Molecular Weight and PEGylation Degree on the Physical Stability of PEGylated Lysozyme PEG的文章。在制藥、生物技術應用時，生產(chǎn)、純化、配制和儲存蛋白過程中所面對的溶液條件是不利于其穩(wěn)定的。這些有害的條件包括極端的pH值變化，高離子濃度或高溫。這些促進蛋白質構象和聚集狀態(tài)發(fā)生非預想變化的主要影響因素的表征，以及對蛋白質穩(wěn)定性的操縱和選擇性控制對生物制藥的研究和過程的發(fā)展至關重要。在這種情況下，聚乙二醇(PEG)以共價鍵連接到蛋白質是一種有價值的改善蛋白質物理化學性質的策略。本文研究了聚乙二醇分子量和聚乙二醇化度對聚乙二醇溶菌酶物理穩(wěn)定性的影響。并通過對溶菌酶進行聚乙二醇處理，使蛋白質的溶解度增加了11倍以上。

2016年Kai Baumgartner等利用Unchained蛋白穩(wěn)定性分析儀Unit/Uncle在Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 上發(fā)表題為Prediction of Salt Effects on Protein Phase Behavior by HIC Retention and Thermal Stability 的文章。在生物制藥業(yè)，了解和確保每個步驟中正確的蛋白相狀態(tài)被作為關鍵質量屬性。不需要的蛋白質沉淀或結晶會導致柱、管或過濾器堵塞。在配方中，當注射到病人體內(nèi)時，聚集物的形成甚至是致命的。典型的說明蛋白質性狀的方法是蛋白質相圖的產(chǎn)生。通常，蛋白質相行為依賴于蛋白質和沉淀劑濃度。盡管使用高通量的方法來生成相圖，但是達到平衡所需的時間是瓶頸。現(xiàn)有一種更快的方法來預測蛋白質相行為。在這項研究中，疏水相互作用色譜滯留時間與晶體大小和形式相關。使用OpTIM®2系統(tǒng)的高通量熱穩(wěn)定性測量值（融化和聚集溫度）成功地與葡萄糖異構酶穩(wěn)定性關聯(lián)上了。通過疏水相互作用色譜和熱穩(wěn)定性測定，成功地預測了不同鹽在特定pH范圍內(nèi)的葡萄糖異構酶構象和膠體穩(wěn)定性。

2016年，Robbert Q. Kim 等利用Unchained蛋白穩(wěn)定性分析儀Unit/Uncle在Journal of Structural Biology上發(fā)表題為Structure of USP7 Catalytic Domain and Three Ubl-domains Reveals a Connector α-helix with Regulatory Role USP7的文章。泛素化是細胞途徑中的一個重要信號，通過降解、重定位或絡合物形成改變目標蛋白的命運。這些信號通過去泛素化酶(DUBs)來平衡，去泛素化與特定蛋白的泛素化過程相反。因為泛素化途徑是至關重要的，所以DUB的活性通常被嚴密控制。USP7是一個表達量非常高的DUB，具有多重靶點，在包括DNA調控、p53應激反應和體內(nèi)蛋白回收等不同的途徑中扮演多種角色。全長的USP7在非活動狀態(tài)和活動狀態(tài)之間進行切換，通過定位在c端HUBL域中的5個Ubl折疊進行調整。活性態(tài)需要后兩個Ubls (USP745)和催化域(USP7CD)之間的相互作用，這可以通過與GMPS相互作用的USP7 (USP7123)的前三個Ubl域的變構相互作用來促進。本文研究了USP7狀態(tài)之間的轉換。提供了USP7CD123的晶體結構，并表明CD和Ubl123通過一個擴展的帶電荷的螺旋連接在一起。使用突變分析來確定這種“連接螺旋”的電荷和剛度對于完整的USP7活性是否重要。