密度梯度分離方法是分離生物大分子常用的方法,其顯著特點(diǎn)是獲得的樣品純度高。但是實(shí)驗(yàn)步驟復(fù)雜,尤其是密度梯度制備過(guò)程,人工操作重復(fù)性差。因此,急需全自動(dòng)程序化設(shè)備來(lái)提高實(shí)驗(yàn)重復(fù)性、準(zhǔn)確性及工作效率。
加拿大BioComp公司生產(chǎn)的密度梯度制備儀和分離儀成為密度梯度制備的金標(biāo)準(zhǔn),為廣大科研工作者提供了巨大的幫助。如下是近期使用Biocomp儀器在國(guó)際期刊上發(fā)表相關(guān)文獻(xiàn)。
1、2019年2月《NATURE COMMUNICATIONS》雜志上發(fā)表《同源六聚體T3SS ATPase-central復(fù)合體的Cryo-EM結(jié)構(gòu)顯示出旋轉(zhuǎn)的ATPase-like非對(duì)稱性》的文章中進(jìn)行EscN-EscO復(fù)合物的甘油梯度離心時(shí),(1)使用BioComp梯度制備儀,用EscNEscO-ADP-AlF3緩沖液,制作10-25%的甘油梯度。(2)使用Biocomp分離儀將梯度分為14個(gè)餾分(3)用Biocomp紫外檢測(cè)器檢測(cè)分離的樣品并進(jìn)行電泳。
2、2019年1月《NATURE COMMUNICATIONS》雜志上發(fā)表《GAPDH的Malonylation是巨噬細(xì)胞的炎癥信號(hào)》的文章中進(jìn)行多核糖體分析時(shí),(1)使用Biocomp儀器制備蔗糖梯度。(2)使用Biocomp儀器檢測(cè)單個(gè)多核糖體組分。
3、2019年2月《NATURE COMMUNICATIONS》雜志上發(fā)表《在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中基因表達(dá)水平的精確調(diào)節(jié)》的文章中進(jìn)行多核糖體分析時(shí),(1)使用Biocomp儀器制備10–50%(w/v)蔗糖梯度。(2)使用Biocomp儀器從頂部分離梯度。
4、2019年2月《Scientific Reports》雜志上發(fā)表《Ribosome profiling analysis of eEF3-depleted Saccharomyces cerevisiae》的文章中進(jìn)行多核糖體概要分析時(shí),(1)使用Biocomp梯度制成7–45%線性蔗糖梯度。(2)使用Biocomp檢測(cè)儀器測(cè)量260nm下的連續(xù)吸光度,分析梯度成分。
5.Biocomp設(shè)備工作的流程圖如下:
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